小针刀治疗是闭合性手术，多在肌腿深部、关节腔、脊柱周围等深层组织中操作，而且刺激证大，对机体局部内环境也有一定的破坏。因此，操作时的无菌要求也较为严格，必须符合常规西医手术无菌操作的要求，否则会造成治疗部位的感染。
1、治疗室的无菌要求
小针刀治疗必须在专门的治疗室内操作．治疗室必须符合外科手术室的无菌要求，如室内紫外线消毒，治疗台和地面要有常规消毒，床单要常换洗、消毒。
2、手术用品消毒
在小针刀治疗时．所用的针刀、手套、洞巾、纱布等用品必须经过高斥蒸汽消毒。一支针刀只能给一个患者甚至只能在一个治疗点使用，防止交叉感染。
3、医生和护士的消毒
在小针刀治疗前，医生和护士必须按照外科手术人员规范化洗手步骤洗手。手术时医生和护士的白衣、口罩、帽子均需消毒。手术过程中护士递送手术用具时要严格按照无菌操作规程。
4、术前定点和术野消毒
在治疗前首先要选好治疗点，并用棉棒蘸紫药水在体表皮肤上做好标志，然后用2%的碘酒棉球在标志上按压，防止标志脱落，再以标志为中心由中心向外逐步向周围5cm的皮肤上涂擦消毒，碘酒干后用酒精脱碘，或者直接用0.75%的碘伏消毒皮肤，最后覆盖上无菌洞巾，标志点正对洞巾的洞口中点。
5、术后操作
小针刀治疗结束后，迅速用创可贴覆盖针孔，如果体表的同一个部位有多个针孔，可以用无菌纱布覆盖针孔并包扎。
