梅毒的长期病程和复杂症状与许多其他疾病相似。因此，必须结合病史、体格检查和实验室检查结果进行诊断。必要时还需采取随访观察、家庭调查、实验治疗等辅助手段。
1.病史：有感染史，潜伏期一般为3～4周。
2.临床表现
（1）硬下疳：直径1～2cm，圆形或椭圆形，稍高出皮面，表面轻度糜烂或浅溃疡，少许分泌物，呈肉红色或暗红色。不痛不痒，触诊时有软骨样硬度。一般单发也可多发。多见于外生殖器，也见于肛门、宫颈、口唇、乳房、手指等部位。
（2）腹股沟淋巴结炎或患部近淋巴结可肿大，常为数个，大小不等，质硬，不粘连，不破溃，无痛感。
（3）可自行消退：不经治疗，经3～4周可自行消退。
3.实验室检查
（1）暗视野显微镜检查：皮损组织液或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体。
（2）梅毒血清学实验检查：用非螺旋体抗原试验（如RPR或USR试验）做筛查，如阴性，只有在怀疑患者为梅毒时才进一步作检查。如果为阳性：①病史及体检结果符合梅毒，可以确定诊断；②病史及体检不符合梅毒者，应进一步作螺旋体抗原试验（如FTA-ABS试验或TPHA试验）；一般来说，试验结果阳性可以肯定梅毒的诊断，如果阴性，则RPR或USR试验的结果为生物学假阳性反应。
以上两项试验有一项阳性即可诊断为梅毒。
4．脑脊液检查对神经梅毒（包括无症状神经梅毒）的诊断、治疗、预后的判断均有帮助。检查项目应包括：白细胞计数、蛋白量及VDRL试验。
