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科普刚刚获诺贝尔奖的CRISPR/Cas9基因编辑技术在肿瘤诊疗中有啥应用呢

2020-10-16 责任编辑:未填 浏览数:34 得宝网

比如,制作癌症小鼠模型。 传统的小鼠模型制作方法是向小鼠胚胎干细胞导入变异,向胚囊注射干细胞形成嵌合小鼠,经过世代得到纯粹的变异小鼠。 CRISPR/Cas9技术有效地提高了小鼠模型的制作效率。

例如,染色体移位是许多肿瘤发生的原因。 用传统方法制作染色体移位的癌症模型,需要在两个移位位点加入loxP序列,用Cre-loxP重组制作染色体移位。 使用CRISPR/Cas9技术进行染色体重排非常简单,目标切断两个重排部位即可。

例如,人2号染色体移位会引起EML4-ALK融合表达,引起非小细胞肺癌。 使用CRISPR/Cas9制作EML4-ALK融合基因肺癌小鼠模型很简单!

在许多情况下,肿瘤是多个基因突变协同作用的结果,如何找到引起癌症的重要突变是一个课题。 张锋团队使用CRISPR/Cas9文库,对无转移能力的肺癌细胞系进行高通量的单基因敲除,移植到免疫缺陷的小鼠身上。 其中,一些细胞远离原位随着血管的移动形成了高转移性肿瘤。 转移性肿瘤的sgRNA测序筛选了参与癌症生成和转移的多个基因和mRNA。

CRISPR/Cas9在癌症治疗中有一些应用可能性,1 .直接攻击癌细胞中的重要基因。 2 .用于编辑免疫细胞,通过免疫细胞攻击癌细胞。 在NIH临床试验注册官网上

CAR-T疗法是采集患者的t细胞进行基因修饰,成为CAR-T细胞后输入患者体内,需要时间,难度高,成本高,t细胞自身的治疗数量受到限制。 CRISPR-Cas9基因编辑技术可以明显提高CAR-T细胞的制备效率,对正常免疫t细胞进行基因改造,在导入CAR序列时去除t细胞内源性T细胞受体基因和人白细胞抗原I(HLA I )类编码基因,产生不同

CRISPR/Cas9技术还可以通过基因敲除编码信号分子的基因和t细胞抑制受体的基因来提高CAR-T细胞的功能。

CAR-T细胞疗法的抗肿瘤效果显着,但只能特异性地识别肿瘤细胞表面受体,而肿瘤特异性t细胞受体(TCR-T )细胞通过基因修饰表达特异性受体,识别肿瘤细胞表面通过I类主要组织相容性抗原提示的抗原肽但是,由于受体t细胞中存在的内源性TCR和修饰的TCR可能有竞争反应,所以采用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备TCR、HLA I类分子和PD1缺失的CAR-T细胞,降低其异体反应,使抗宿主疾病

例如,即使通过CRISPR-Cas9基因编辑技术基因敲除参与免疫负调节的基因,也能达到同样的抗肿瘤效果,是全新的治疗思路。 利用电穿孔法将Cas9和sgRNA导入t细胞,敲除PD-1基因减少表达,长时间体外培养未见PD-1对t细胞活化的影响,使T细胞更好地发挥抗肿瘤效果。 这种新的阻断疗法经常与过继性t细胞免疫疗法结合使用,可以提高免疫细胞的活性。

CAR-T领域的先驱Carl June教授发表在Clinical Cancer Research杂志上的文章表明,体外和动物模型的研究中,TCR和B2M两个免疫排除相关的基因在CIRSPR技术中被击倒后,成为T细胞的同种

总之,CRISPR/Cas9技术在肿瘤的诊治和研究中有很多应用前景! 这项技术有可能使肿瘤治疗进入新时代! 但是,CRISPR/Cas9技术也有问题。 比如,拆目标的问题! 还有伦理学的问题! 任何技术都不完美! 另外,科学家在进行人体实验时必须遵循伦理原则。

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