肠道原虫检测碘液染色涂片法,肠道原虫检测碘液染色涂片法怎么做?接下来,天医网小编就带你了解一下吧!
检测步骤
6.1 样本准备
将5 g~10 g新鲜粪便置于粪便采样盒内,在粪便采样盒上标识编号、患者姓名、采集日期,样本
应在24 h内进行检测,如未能及时检测,应在4℃条件下冷藏保存,时间不超过72 h。
6.2 样本检测
于载玻片近中央处,滴1滴配制好的碘液。用竹签挑取绿豆大小粪便,放于碘液中搅匀,涂成直径1 cm左右、较为均匀的粪膜,厚度以透过粪膜略能辨认其下面报纸的字迹为宜。覆以盖玻片,置显微镜下检查(参见附录B)。
6.3 镜下观察
使用物镜40×进行观察,按照自左到右、从上到下的顺序查找肠道原虫包囊或卵囊(参见附录B和附录C)。
6.4 结果判定
观察全部涂片发现包囊或卵囊为阳性,未发现包囊或卵囊判定为阴性。以包囊或卵囊大小、形状、核的数目、核周染色质粒形状和分布、核仁形状和位置、有无纤丝及纤丝排列形状、糖原块和拟染色体等形态特征判定虫种
B.1 粪便检查
于载玻片近中央处,滴1滴配制好的碘液,用竹签挑取绿豆大小新鲜粪便,放于碘液中搅匀,涂成直径1 cm左右、较为均匀的粪膜,粪膜厚度以透过粪膜略能辨认其下面报纸的字迹为宜。覆以盖玻片,置显微镜下检查。先用物镜10×找到视野,再用物镜40×进行观察,必要时可用物镜100×观察包囊或卵囊镜下结构特征,用测微尺测量包囊或卵囊大小。按照自左到右、从上到下的顺序查找肠道原虫包囊或卵囊。观察全部涂片发现包囊或卵囊为阳性,未发现原虫包囊或卵囊判定结果为阴性。以包囊或卵囊大小、形状、核的数目、核周染色质粒形状和分布、核仁形状和位置、有无纤丝及纤丝排列形状、糖原块和拟染色体等形态特征判定虫种。
为避免造成漏检,应隔天采集粪便,连续3次以上。对于一些慢性患者,粪检应持续1周~3周,多次检查,以确保无漏诊病人。常见肠道原虫的包囊或卵囊多见于慢性腹泻患者及成形粪便,而滋养体多见于稀便或带有脓血的粪便,滋养体检测常用生理盐水直接涂片法。
盛粪便的容器要干净,并防止污染及干燥,粪便不可混杂尿液等,在粪便采样盒上标识编号、患者姓名、采集日期,24 h内进行检测。
检测过程中工作人员应做好安全防护,避免粪便污染环境。用具每次使用后要清洗干净并彻底消毒,废弃物应按医疗废物处置要求处置。
B.2 迈氏唇鞭毛虫
迈氏唇鞭毛虫包囊呈梨形或柠檬状,长度为6.5 μm~10.0 μm,壁薄,有1个细胞核,细胞器包括胞口纤维(cytostomal fibrils)、动基体和轴丝(axonemes)等。对迈氏唇鞭毛虫,应采集新鲜粪便做碘液染色,在物镜40×和物镜100×下观察,以提高查找包囊的机会。
B.3 贝氏等孢球虫
贝氏等孢球虫卵囊微小,颜色浅,且虫体在体外容易裂解,很容易漏检。采用2.5%重铬酸钾保存的粪便标本,可杀灭全部细菌,有利于检出卵囊,并可以长久保存标本。
B.4 隐孢子虫
隐孢子虫卵囊呈圆形或椭圆形,因虫种而异大小不一,在4 μm~6 μm范围内。囊壁光滑、无色,囊内含有4个子孢子。子孢子月牙状,大小为1.5 μm×0.8 μm,核1个,位于虫体后部。卵囊内含残余体1个,由成堆颗粒状物和一空泡组成。隐孢子虫卵囊在碘液涂片检测中漏检率较高,常用抗酸染色法进行检测。
急性隐孢子虫病人,其腹泻粪便中含有较多卵囊,一般碘液染色涂片法即可。如检查与病人或家畜接触过的人群、复查治疗后的病人时,采用浓集法可提高检出率,判断困难时需使用金胺-酚染色、改良抗酸染色等特殊染色进行鉴别。
B.5 结肠小袋纤毛虫
结肠小袋纤毛虫包囊呈圆形或卵圆形,直径为40 μm~60 μm,呈淡黄色或浅绿色。囊壁厚而透明,染色后可见胞核。新形成的包囊可清晰见到滋养体在囊内活动。结肠小袋纤毛虫包囊的排出常呈间歇性,故需反复检查。